SDS-PAGE凝(níng )胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(⌚),即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和分(💫)子生物学(xué )实验中常用的蛋(dàn )白质分离和鉴定技术,这(zhè )项技术的基本(běn )原理是(shì )利用蛋白质在电(diàn )场中的迁移率与其(😿)(qí )分子量成(🌽)反比的关(guān )系,通过添加(jiā )阴离子(🏐)(zǐ )洗涤剂SDS(十二(èr )烷(😣)基硫酸钠)使蛋白质带上负电荷,从而消(xiā(🚽)o )除(chú )了蛋白质原有的(🛤)电荷差异,使得蛋白质的迁移(🧔)仅受其大小的影响。
操作(zuò )步骤方面,首先(🐱)需要(yào )制(🚑)备适(shì )当浓度和pH值的聚(⛱)丙烯酰胺(àn )凝胶,然后将含(🥢)(hán )有(yǒ(🏨)u )SDS和还原剂的蛋白质(zhì )样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白(🥄)质开始根据(jù )大小(xiǎo )分离,小分子(zǐ )蛋白质移动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色或西方(fāng )印迹等方(💓)法可以检测和分析(🐀)蛋白质(📄)。
应用(yòng )范围广(guǎng )泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还广泛应用于(yú )蛋(dà(🤗)n )白质(⛳)纯化程度的分析、蛋白(🏐)质变性和复性(xìng )研究以及蛋白质-蛋白质(zhì )相互作用的(de )研(yán )究,它也是研究蛋白质翻译后(hòu )修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的(de )分析(xī )工具,但它也有局(🤨)限性,对于极端大(dà )小(🈵)的蛋(🏔)白质,分(fèn )辨率可能(néng )会降低;某些蛋白质可能因为结构的特殊性而在凝(níng )胶(🎻)中(zhōng )的迁移不符合预期,在(zài )进(jìn )行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分子生物学技术以(🧚)获得更准确的结果。
视频本站于2024-10-25 05:10:07收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。