SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶(jiāo )电泳(🔓),是生(shēng )物化(huà )学和分子生物学实验中常(cháng )用的蛋白质分离和鉴定技(🙍)术,这项技术的(🤾)基本(💊)原(yuán )理(lǐ )是利用蛋白质在电场中的迁移率与其分子(📐)量成(chéng )反(❔)比的关系,通过(🌆)(guò )添加阴(yīn )离子洗涤剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质带上负电荷,从而消除了(🐱)蛋白质(zhì )原有的电荷差异,使(🤔)得蛋白质的迁移(yí )仅(✖)受其大小的(📉)影响(xiǎng )。
操作步骤(🏕)方面,首先需(🦉)要制备适当浓度和pH值的(de )聚丙(bǐng )烯酰胺凝胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋白(bái )质(zhì )样品加入凝胶孔(kǒng )中(🐿),通电后,蛋白质开始根据大小分离(📛),小分子蛋白(🌿)质移动得更(gèng )快,而大(dà )分子蛋白质则较慢,通(tōng )过染色或西方印迹(🕖)等方(fāng )法可以检(🍱)测和分析(xī )蛋白质。
应用范(fàn )围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还广(guǎng )泛应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋白质(zhì )变(biàn )性和复性研究以及蛋白质-蛋白质相互作(🚰)用的研究,它也是研究蛋白质翻译后修饰的重要(🍢)(yào )工具。
尽(🧗)管SDS-PAGE是一种强大的分析工具,但它也有局限性,对(duì )于极端(duān )大(dà )小的(de )蛋白质,分(👘)辨率(lǜ )可能会降低;某些蛋白质可能因为结构的特殊(🤴)性而在凝胶中的迁移不符合(💼)预期,在进行SDS-PAGE分析(xī )时,通(tōng )常需(xū )要结合其他生化(✝)(huà )和分子生物学技(jì )术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-11-02 01:11:19收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。