SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和分子生物学实验中常用的蛋白(bái )质分离和鉴定(dìng )技术,这项技(jì )术的基本(běn )原理是(shì )利用蛋白质在电场中的迁移(yí )率与其分子量成(🚓)反比的关系,通过添加阴(yīn )离子洗涤剂SDS(十二烷基硫酸钠)(🏺)使蛋白质带上负电荷,从而(ér )消除了蛋白质原(🥚)有的(de )电荷(🅱)差异,使得蛋白质的迁移仅受其大小的影响。
操作步骤(🏷)方面(miàn ),首先需(xū )要制备适当(dāng )浓度和(📬)pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含有SDS和(hé )还原(yuán )剂的蛋白质样品加(🎆)入凝(👩)胶孔中,通电后,蛋(dàn )白质开始根(😢)据(🕤)大小分离(lí ),小分子蛋白质移动得(dé )更快,而大分子蛋白质(🌆)(zhì )则较慢,通过染(rǎ(👮)n )色或(huò )西(xī )方印迹等方法可(kě )以检(jiǎn )测和分(fèn )析(➿)蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于(😙)蛋白质(📗)分子量(liàng )的测定,还广泛(fàn )应用(😿)于蛋白质纯化程度的分(fèn )析、蛋(🐲)白质变(🚄)性和复性(🦄)研究(jiū )以及蛋白(🕠)质-蛋白质(zhì )相互作用的(⤴)研究,它也是研(💣)究蛋白(bái )质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分(fèn )析工具,但(dàn )它也有局(jú )限性,对于极端大(dà )小(🕟)的(👏)蛋白质,分辨率(lǜ )可(kě )能(néng )会降低;某些蛋(dàn )白质可(kě )能(néng )因为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不符合预期,在进(💠)行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分子生物学技术以获得(dé )更准确的结果。
视频本站于2024-11-01 08:11:40收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。